Multipl miyelomda T regulatuar hücrelerin (TREG) tedaviye etkinliğine etkisinin ex vivo araştırılması
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Dokuz Eylül Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2014
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: AYŞE PINAR ERÇETİN
Danışman: SAFİYE AKTAŞ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Multipl miyelom (MM) plazma hücrelerinin ve öncülerinin malign proliferasyonu ile karakterize olan hematolojik bir kanser türüdür. MM hücreleri konak T hucreleri tarafından tanınabilecek antijenler eksprese etmesine rağmen immün sistem tarafından nadiren yok edilebilmekte olup bu durum tümör mikroçevresi tarafindan gerçekleştirilen immunsüpresyon ile ilişkilendirilmektedir. Otoimmun kontrolde, T-hücre homeostazinde, tüm immün yanıtının immünmodulasyonunda önemli rolu olan immünsüpresif CD4+CD25+Foxp3+ fenotipindeki düzenleyici T hücrelerin (Treg) MM hastalarının periferik kanında yüksek düzeylerde olduğu ilgili literatürde tespit edilmiştir. Bu bilgiler ışığında bu projenin amacı, CD4+CD25+Foxp3+ Treg hücrelerinin birinci basamak tedavide ve relaps hastalarının tedavisinde hedefe yönelik tedavi seçeneği olarak kullanılan bir proteozom inhibitörü olan bortezomibin malign miyelom hücreleri üzerindeki öldürücü etkinliğine olan etkisinin ex vivo değerlendirilmesidir. Yeni tani almis olan 20 MM olgusundan periferik kan ve kemik iligi örnekleri topladiktan sonra CD4+CD25+ Treg hücrelerini periferik kan mononukleer hucrelerinden (PBMC) manyetik yolla izole edilip, safligi akim sitometrik analiz ile konfirme edilmiştir. Olguların kemik iliği aspirasyon örneklerinden ficoll dansite gradient santrifuju yoluyla izole edilen kemik iliği mononükleer hücreleri (BMMC) 72 saat boyunca RPMI ortaminda 37°C 'de %5 CO2 'lik etüvde inkübe edilmiştir. Daha sonra her hasta için ayrı ayrı tespit edilen LD50 dozundaki bortezomib, izole edilen Treg hücreleri ve kombinasyonu ayrı kuyucuklara ilave edilmiştir. 24 saatlik inkübasyon ardından CD138+ miyelom hücrelerinin canlılığı alt gruplarda kontrolleri ile kıyaslayarak ve her gruptaki total hücre sayıları göz önünde bulundurulup uygun hesaplamalarla her hasta için değerlendirilmiştir. Bulgular SPSS 15.0 programı ile Mann Whitney U non-parametrik testi ve ki-kare testleri ile istatistiksel olarak analiz edilmiştir. Sağ kalım analizleri Kaplan-Meier testi ile gerçekleştirilmiştir. P<0.05 değeri istatistiksel olarak anlamlı kabul edilmiştir. Bu çalışmada Treg hücreler %90 üzerinde saflıkla izole edilebilmiştir ve MM temsil eden primer kültür yapılabilmiştir. Klinik bortezomibe direnç göstermeyen 2 olguda in vitro bortezomib duyarlılığı düşük çıkmıştır. İn vitro hastadan elde edilen malign miyelom hücrelerine aynı hastanın Treg hücreleri verildiğinde çok geniş bir hücre ölüm yanıt dağılımı saptanmıştır. Treglere in vitro hücre ölümü şeklinde yanıt veren MM olgularımızda bortezomib direnci olmaması ile istatistiksel anlamlı ilişki saptanmıştır (p=0,024). Klinikte bortezomib direnci olmayan hastalarda ex vivo Treg ekspansiyonunun malign miyelom hücrelerine bortezomible verildiğinde bortezomibin öldürücü etkisini arttırmasının korele olduğu görülmüştür (p=0,022). MM ex vivo hasta örneklerini içeren bu çalışmaya göre, hastaların periferik kanından elde edilen Treg hücrelerin klinikte bortezomibe yanıt veren olgularda bortezomibin in vitro anti-tumor etkisini arttırdığı ve yanıt vermeyen olgularda azalttığı saptanmıştır. Bu durum bortezomib yanıtında Treglerin etkisi olduğunu göstermektedir.