THE IMPACT OF TRAIL ON M1, M2A, AND M2C POLARIZATION OF PRIMARY HUMAN MACROPHAGES

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Dokuz Eylül Üniversitesi, İzmir Uluslararası Biyotıp ve Genom Enstitüsü, Genomik ve Moleküler Biyoteknoloji Bölümü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2022

Tezin Dili: İngilizce

Öğrenci: SİNEM GÜNALP

Danışman: Duygu Sağ

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL), hücre ölümünü veya sağkalım yollarını tetikler. TRAIL, tümör hücresini öldürmesinin yanı sıra, tümör mikroçevresindeki immün hücrelerin canlılığını da regüle eder. Makrofajlar M1 veya M2 fenotiplerine polarize olabilmektedirler. M1 makrofajları proinflamatuar/tümörle savaşan hücreler iken, M2 makrofajları düzenleyici/tümör destekleyici hücrelerdir. TRAIL'in makrofaj polarizasyonu üzerindeki etkisi kapsamlı bir şekilde incelenmemiştir. Bu çalışmanın amacı bu etkiyi araştırmaktır. İnsan monosit türevli makrofajları ya TRAIL ile ya da DR4 veya DR5'e spesifik ligandlar ile önceden uyarılmıştır; veya insan monositleri TRAIL varlığında makrofajlara diferansiye edilmiştir ve ardından M1, M2a veya M2c fenotiplerine polarize edilmişlerdir. Buna ilaveten, öncesinden M2'ye polarize edilmiş makrofajlar TRAIL ile uyarılmıştır. Makrofajlardaki M1/M2 belirteçlerinin ekspresyonu qPCR/ELISA/akış sitometrisi ile analiz edilmiştir. Ayrıca, makrofajların U937 AML tümör hedeflerine karşı sitotoksisitesi, akış sitometrisi ile ölçülmüştür. TRAIL ön uyarımı, M1 belirteçlerinin ekspresyonunu mRNA ve protein düzeyinde arttırırken, belirli M2 belirteçlerinin ekspresyonunu mRNA ve protein düzeyinde azaltarak primer insan makrofaj alt tiplerini M1 fenotipine yönlendirmiştir. Benzer şekilde, monositten makrofaj diferansiyasyonu aşamasındaki TRAIL'in varlığı da makrofaj alt tiplerinde M1 belirteçlerinin ekspresyonunu arttırmıştır. Ek olarak, TRAIL uyarımı M2 makrofajlarının M1'e yönelimini arttırmıştır. Sonuçlarımız hem DR4 hem de DR5 reseptörlerinin makrofaj polarizasyonunda rol oynadığını göstermektedir. Son olarak, TRAIL, U937 kanser hücrelerine karşı M1 makrofajlarının sitotoksisitesini arttırabilmektedir Kısaca, TRAIL, primer insan makrofajlarını tümörle savaşan M1 fenotipine yönlendirmektedir. Çalışmamız TRAIL'in M1 polarizasyonunu arttırarak tümör mikroçevresindeki anti-tümörijenik yanıtı arttırabileceğini öne sürmektedir.