40. Türk Mikrobiyoloji Kongresi, Antalya, Turkey, 16 - 22 November 2022, pp.252, (Summary Text)
Giriş ve Amaç: Araştırmada EUCAST’ın önerdiği Doğrudan Hızlı Antimikrobiyal Duyarlılık Testi (HADT) rutin laboratuvarda
çalışıldığında çıkacak sorunların ve çözüm yollarının belirlenmesi amaçlanmıştır.
Gereç ve Yöntem: Pozitif sinyal veren kan kültürü şişeleri 20 dakika içinde katı besiyerlerine pasaj ve direkt bakı yapılıp cihaza geri
yüklendi. Direkt bakısında Gram negatif basil saptanan örnekler inkübasyon süresi 18 saati geçmeyecek şekilde toplu halde cihazdan
çıkartılarak HADT çalışıldı. Her hastanın yalnızca bir örneği alındı. Zon çapları 4.-6.-8.-16. saatlerde kaydedildi ve MALDI-TOF’la
tanımlanan bakteriye uygun olarak yorumlandı. Birden fazla mikroorganizma üreyen, HADT sınır değeri tanımlanmamış bakterilerin
ürediği örnekler değerlendirilmedi. Sonuçlar disk difüzyon yöntemiyle elde edilen rutin laboratuvar sonuçları ile karşılaştırıldı.
Uygulama sırasında yaşanan sorunlar ve üretilen alternatif çözüm yöntemleri belirlendi.
Bulgular ve Sonuç: 62 örneğin %20.9’unda üreyen bakteri türleri için sınır değer bildirilmediğinden, %11.2’sinde birden fazla
bakteri türü ürediğinden değerlendirilemedi. Örneklerin %22.5’sinde E.coli, %30.6’unda K.pneumoniae, %8’inde P.aeruginosa,
%6.4’nde A.baumannii üredi. Şekil 1’de her okuma saati için zon sınırları net olmadığından okunamayan, Teknik Belirsizlik Alanı
içinde kaldığından yorumlanamayan ve yorumlanabilen örneklerin yüzde oranları pasta grafikle; yorumlanabilen örneklerin rutin
laboratuvar sonuçlarıyla uyumlarının sayısal dağılımları sütun grafikle gösterilmiştir. HADT ile her dört okuma saatinde örneklerin
en az %90’nında rapor edilebilir sonuç elde edilebilmiştir. Sonuçlar arasında değişen sayılarda küçük, büyük ve çok büyük hatalar
gözlenmiştir. Aynı zamanda rutin uygulama sırasında karşılaşılan bazı sorunlar ve bir kısmına üretilen alternatif çözümler aşağıdaki
maddelerde özetlenmiştir.•Her pozitif sinyal oluştuğunda tek tek HADT çalışılması iş yükü nedeniyle mümkün olmamıştır. Toplu
çalışma amacıyla şişelerin tekrar cihaza yüklenmesi cihaz kapasitesini azaltmış ve pozitif sinyallerin ayırt edilmesini güçleştirmiştir.
•Toplu HADT çalışılmasında şişeden ikinci kez örnek alınmıştır. Ancak antibiyogram plaklarında buna bağlı kontaminasyon
gözlenmemiştir.•İnokulasyon basamağında EUCAST önerilerinden olan farklı tüpe aktarma yöntemi kontaminasyon riski
oluşturmaktadır. Bir diğer önerisi şırıngadan damlatma yöntemini ise pratikte uygulamak standardizasyonu güçleştirmektedir.
Sorun insülin enjektörünün ölçü birimleri kullanılarak aşılmıştır.•İnokulasyonun yayılması basamağında EUCAST’ın önerdiği
şekilde 3 yönde yaymanın yeterli olmadığı ve özellikle 4. saat değerlendirmelerinde zon çaplarının okunmasında zorluk yarattığı
saptanmıştır. Çözüm olarak sonraki örnekler en az 5 yönde homojenize olana kadar yayılmıştır.Sonuç olarak her laboratuvarın kendi
iş akışına uygun rutin HADT çalışma düzenini oluşturması gerekmektedir. Aynı zamanda HADT sistemine daha çok bakteri türü dahil
edilerek verimliliğin arttırılması sistemin geliştirilmesi gereken yönlerindendir.