Nöroblastomda Retinoik Aside Bağlı Diferansiasyon ve Eksozom Aracılı miRNA Ekspresyonları (TPOG Adına)

Altun Z. S., Kum Özşengezer S., Yuan H., Kızmazoğlu D., Aktaş S., Olgun H. N.

XXII. TPOG Ulusal Pediatrik Kanser Kongresi, Antalya, Türkiye, 8 - 12 Mart 2023, ss.76

  • Yayın Türü: Bildiri / Özet Bildiri
  • Basıldığı Şehir: Antalya
  • Basıldığı Ülke: Türkiye
  • Sayfa Sayıları: ss.76
  • Dokuz Eylül Üniversitesi Adresli: Evet

Özet

Giriş: Nöroblastom, tüm çocukluk çağı kanserlerinin %8-10’unu oluşturan çocukluk çağının en sık görülen ekstrakraniyal solid tümörüdür. Retinoik asid (RA) nöroblastom tedavisinde kullanılan diferansiye edici ajandır. Nöroblastomun ana kemoterapötik ajanı ise sisplatindir (CDDP). Eksozomlar ve içerdikleri mikrornalar (miRNA) ideal bir biyobelirteç yanında tedavi ajanı olarak kullanımları da mümkündür. miRNA’lar küçük kodlamayan tek iplikli RNA’lar olup, 6-8 adet genin ekspresyonunu düzenleyen epigenetik moleküllerdir. Bu çalışmanın amacı; nöroblastom hücrelerinde diferansiasyon süreçlerinde etkili olduğu bildirilen miRNA’ların, retinoik asit, sisplatin ve retinoik asit ile sisplatin kombinasyonu ile eksozom aracılı olarak ekspresyonlarının değişip değişmediğinin belirlenmesiydi.

Yöntem: İnsan SH-SY5Y nöroblastom hücrelerine RA (1uM-5gün) uygulaması ile diferansiye olmaları sağlandı. Diferansiasyon sonrasında hücrelere CDDP (20uM-24saat) eklenmesi ile RA-CDDP kombine tedavi modeli uygulandı. Kontrol, RA, CDDP ve RA-CDDP uygulanmış hücrelerden eksozomlar ve onlardan da miRNA’lar izole edildi. Hücrelerden elde edilen eksozom aracılı miRNA (miR-132-5p, miR-490-3p, miR-34a ve miR-323a-5p) ekpsresyonları RT-PCR yöntemi ile çalışıldı.

Sonuç: CDDP uygulaması ile hücrelerde miR-323a-5p ekspresyonu kontrole göre 100 kat artış gösterirken, RA grubuna göre 9 kat ve RA-CDDP grubuna kıyasla da 3 kat artış gösterdi. miR-323a-5p ekspresyonu RA grubunda kontrole göre 5 kat, RA-CDDP grubuna göre ise 30 kat ekspresyonu arttı. RA uygulaması ile miR-34a, miR-132-5p ve miR-490-5p ekspresyonları değişmedi. CDDP ve RA-CDDP grubunda miR-34a ekspresyonu kontrole göre 1 kat arttı.  miR-490-5p ekspresyonu CDDP ile kontrole göre değişmezken, RA-CDDP ile 7 kat artış gösterdi.

Tartışma: NB hücrelerinin RA aracılı diferansiasyonu ve CDDP ile tedavide ve tek başlarına uygulamalarında da hücrelerden eksozom aracılı olarak miRNA ekspresyon düzeylerini değiştirdiği saptandı. Çalışma sonuçları nöroblastomun tedavi süreçlerinde eksozom aracılı olarak miRNA ekspresyon değişimi yolu ile birçok hedef genin ekspresyonunun da kontrol edilebileceğine işaret etmektedir. Nöroblastomda diferansiasyon sürecinde etkili olan miRNA’ların eksozom aracılı belirlenmesi tedavi yanıtlarının değerlendirilmesi açısından kullanışlı olabilir. Klinikte nöroblastom tedavisinin uygulanması ve izleminde eksozom aracılı mikroRNA gen ekspresyon paternlerinin belirlenmesi özellikle epigenetik modifikasyonlara yeni bakış açısı getirebilecektir.