Hastane su sistemlerinden alınan örneklerden Legionella pneumophilia tanısında kültür ve konvensiyonel pzt’xx nin karşılaştırılması


Creative Commons License

Güldaş N., Gülay Z. (Yürütücü), Öktem İ. M. A., Alp Çavuş S., Sarı A. N.

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2017 - 2020

  • Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
  • Başlama Tarihi: Temmuz 2017
  • Bitiş Tarihi: Ekim 2020

Proje Özeti

Doğal su kaynakları ve insan yapımı su sistemlerinde yaygın olarak bulunan Legionella bakterilerinin hastane su sistemlerinde kolonize olmaları nasokomiyal Legionellosis’in başlıca nedenidir. Hastane su sistemlerinin Legionella açısından izlenmesi nasokomiyal Legionellosis’in önlenmesinde ve kontrolünde ilk yaklaşımdır. Legionella sürveyansı için en çok kullanılan yöntem olan kültür altın standarttır. Ancak uzun enkübasyon periyodu ve zayıf duyarlılığı Legionella salgınına müdahale etmede gecikmelere neden olmaktadır. Son yıllarda Polimeraz Zincir Tepkimesi (PZT) çevresel örneklerin taranmasında tamamlayıcı bir yöntem olarak bildirilmekte ve PZT’nın kültürdeki kısıtlılıkların üstesinden gelebildiği belirtilmektedir. Bu projede hastanemiz su sistemlerindeki Legionella kontaminasyonunun prevalansını kültür ve konvansiyonel PZT ile araştırarak her iki yöntemin duyarlılıklarını karşılaştırmayı amaçlandı. Legionella pneumophilia pozitif su örnekleri ve kültür plakları optimizasyon çalışmaları için kullanıldı. Kolonilerden yapılan DNA ekstraksiyonu sonucu elde edilen DNA’ lar PZT de pozitif kontrol olarak yer aldı. Sulardan DNA izolasyonu için filtrasyon sonrası kit ile DNA ekstraksiyonu yapıldı. 16S rRNA ve mip gen bölgesi için PZT gerçekleştirildi. Optimizasyon çalışmaları sonucunda oluşturduğumuz protokol ile Legionella pneumophilia pozitif su örneklerinde 16S rRNA gen bölgesini saptayabildik ancak mip gen bölgesini gözlemleyemedik. Hastanemizin farklı bölgelerinden alınan 52 su örneğinde Legionella izlemi için kültür ve PZT’ ni eş zamanlı olarak gerçekleştirdik. Örneklerin tümünde kültürde üreme saptanmaz iken PZT’de her iki gen bölgesi gözlenmedi. Nasokomiyal Legionellosisin önlenmesi için hastane su sistemlerinin düzenli aralıklarla izlenmesi önem taşımaktadır. Hastanemiz su örneklerinde gerek kültür, gerekse PZT ile Legionella saptanmaması bu konuda yapılan çalışmaların etkinliğini göstermektedir. Su örneklerinde Legionella’nın taranmasında 16S rRNA temelli PZT, kültür ile birlikte kullanılabilir. Kültür sonucu oluşan kolonilerden DNA izolasyonu, PZT ve DNA dizi analizi ile virulan Legionella türleri belirlenebilir. PZT’nin konvansiyonel kültürün yerini almadan önce duyarlılık ve özgüllüğü hakkında daha fazla bilgiye ihtiyaç vardır.